Die Zellformung beinhaltet die Schritte der Zellinjektion, Formung und Gewinnung. Die Zellen in der Zellkulturflasche müssen bis zu einem gewissen Grad wachsen und sich entwickeln. In diesem Moment ist es notwendig, sich auf Trypsin zu verlassen, um die Zellen an der Außenwand des Kolbens zu verdauen und es dann zu fühlen. Bei Enzymen muss die Verdauungszeit kontrolliert werden.
T75 Zellkulturflasche
Trypsin gehört zu einer anderen Klasse von Trypsin, das Proteine auf Zellmembranen abbauen kann, die mit Zellkulturflaschen fusioniert sind. Durch Auflösen des Proteins an dem entsprechenden Teil wird das Protein an der Verbindungsstelle zwischen den Proteinen aufgelöst und die Zelle wird aufgrund der Stützkraft des Zellrahmens ihrer eigenen inneren Struktur kugelförmig, wodurch die Zellen getrennt werden. Der Grad der Trypsin-Verdauung ist ein Schlüsselfaktor bei der Zellformung: Übermäßige Verdauung erhöht Zelltrümmer, schwarze Trümmer nehmen zu, Zellen fallen als Ganzes ab, was die Lebensfähigkeit der Zellen ernsthaft gefährdet, und einige Zellen schwimmen mit dem verworfenen Trypsin-Ausfluss; Reicht die Verdauung nicht aus, können die Zellen nur schwer von der Flascheninnenwand heruntergeschleudert werden und durch das ständige Blasen und Schlagen wird auch die Zellaktivität geschädigt.
Zellkulturflasche
Flasche mit Serumproteinkulturlösung
In verschiedenen Organen oder Zellen ist die Wirkung von Pankreasenzymen nicht gleich. Die Aktivität der dispergierten Pankreasenzymzellen hängt auch von ihrem Konzentrationswert, ihrer Temperatur und ihrer Wirkungsdauer ab. Wenn der pH-Wert 8,0 und die Temperatur 37 beträgt, ist die Wirksamkeit der wässrigen Lösung des Pankreasenzyms relativ stark. Bei der Anwendung von Trypsin sollten Konzentration, Temperatur und Dauer gut kontrolliert werden, um Zellschäden durch übermäßige Verdauung zu vermeiden. Da Ca2, Mg2 und Serumprotein, Proteingramm die Aktivität von Pankreatin reduzieren, verwenden Sie bei der Zubereitung einer wässrigen Lösung von Pankreatin BSS ohne Ca2, Mg2, wie z. B.: D-Hanks-Lösung. Beim Stoppen der Verdauung kann Trypsin mit Serumprotein-Zellkulturmedium oder Trypsin-Retarder gestoppt werden, um die Wirkung von Trypsin auf Zellen zu stoppen.
Kulturflasche
T25 Zellkulturflasche
Wenn es sich um eine neu gekaufte Zelle handelt, können Sie außerdem mit einer niedrigeren Trypsinkonzentration zuerst die Verdauungszeit untersuchen und beobachten, ob die Zellen jede Minute rund werden, und eine gute Aufzeichnung machen. Insgesamt ist es bei der Gewinnung der Zellen in der Zellkulturflasche notwendig, die Trypsinierungszeit zu kontrollieren, um die Lebensfähigkeit der Zellen effektiv zu erhalten.
