Möglichkeiten zur Vermeidung von Zellkontaminationen: Pipettiertipps, die Sie kennen müssen
Unter den vielen Variablen, die in der Zellkultur kontrolliert werden, beeinflusst eine bestimmte Variable das gesamte Experiment: die Kontamination. Ein Faktor, der zur zellulären Kontamination beiträgt, ist nicht immer auf dem Radar, und obwohl er die Zellgesundheit unbemerkt beeinträchtigen und Messdaten beeinflussen kann, ist er die Pipettierkontamination.
Der Auswahl von Pipetten, Pipettenspitzen und Pipettierprogrammen wird beim Entwerfen von Experimenten wenig Beachtung geschenkt. Selbst eine Schutzlösung (Autoklavieren) zur Vermeidung einer Pipettierkontamination ist möglicherweise nicht so effektiv wie allgemein angenommen.
Die erste Regel der Zellkultur: Kontamination vermeiden. Warum ist Steriltechnik so wichtig für eine erfolgreiche Zellkultur?
Die aseptische Technik ist die einzige Möglichkeit, zuverlässige und reproduzierbare Ergebnisse zu erzielen. Umweltverschmutzung kann das Zellwachstum, den Stoffwechsel und die Gesundheit beeinträchtigen --, etwas, an dem Wissenschaftler interessiert sind. Kontaminierte Zelllinien haben nicht die gewünschten Eigenschaften und funktionieren je nach Schwere der Kontamination jedes Mal anders. Auch wenn Kontaminanten Ihre interessierenden Zellen überwuchern, könnten Sie am Ende den falschen Organismus untersuchen.
Auf welche Arten von Schadstoffen stoßen Wissenschaftler häufig?
Häufige Kontaminationsquellen sind Bakterien, Hefen und Schimmelpilze. Bei der Zellkulturarbeit ist Mycoplasma am schwierigsten zu erkennen und zu beseitigen. Weniger häufige Kontaminationsarten sind beispielsweise auslaugbare Kunststoffe in Laborverbrauchsmaterialien.
Was sind die häufigsten Ursachen für Zellkontamination?
Eine häufige Kontaminationsquelle ist schlechtes Pipettieren, wie z. B. die Verwendung von kontaminierten Pipetten und Spitzen ohne Filter. Darüber hinaus ist ein Mangel an guter Laborpraxis, wie z. B. eine unzureichende Dekontamination von Instrumenten wie Inkubatoren oder Laminar-Flow-Werkbänken, ebenfalls ein Problem. Zur Entfernung von Mykoplasmen ist eine Filtration mit einem 0,1-µm-Filter anstelle eines 0,2-µm-Filters erforderlich.
Drei Pipettierkontaminationen:
1. Pipette-zu-Probe-Kontamination: Die Pipette oder Pipettenspitze kontaminiert die Probe.
So vermeiden Sie:
Verwenden Sie sterile Filterspitzen, um eine Kontamination des Pipettenkörpers zu vermeiden.
Wechseln Sie die Pipettenspitze nach jeder Probe.
Pipetten regelmäßig mit Ethanol autoklavieren oder sterilisieren. Wählen Sie eine Autoklav-kompatible Pipette.
2. Probe-zu-Pipette-Kontamination: Das Pipettieren der Probe in den Pipettenkörper kontaminiert die Pipette.
So vermeiden Sie:
Verwenden Sie Filterspitzen oder Direktverdrängungsspitzen, um zu verhindern, dass Proben in den Pipettenkörper gelangen.
Halten Sie die Pipette beim Pipettieren in einer senkrechten Position. Pipette aufrecht lagern.
Kippen Sie die Flasche beim Pipettieren.
Lassen Sie die Taste langsam los, um zu vermeiden, dass die Probe in die Pipette spritzt. Wählen Sie eine Pipette mit Soft-Eject-Funktion.
3. Kontamination zwischen Proben: Verbleibende Pipettierproben werden auf die nächste Probe übertragen. Tritt normalerweise auf, wenn dieselbe Spitze mehrmals verwendet wird.
So vermeiden Sie:
Wechseln Sie die Pipettenspitze nach jeder Probe.
Verwenden Sie Filterspitzen oder Direktverdrängungsspitzen, um zu verhindern, dass die Probe in den Pipettenkörper und zur nächsten Probe gelangt.
Stellen Sie sicher, dass die Pipettenspitze auf der Pipette versiegelt ist, um ein Auslaufen der Probe zu vermeiden. Zum Beispiel die Spitze von Yongyue Medical.
Gibt es Kontaminationsfaktoren, die Wissenschaftlern vielleicht gar nicht bewusst sind?
Die Effizienz des Autoklavierens wird oft nicht überprüft, und wenn der Autoklav nicht richtig funktioniert, sind die autoklavierten Pipettenspitzen möglicherweise nicht steril. Vorsterilisierte, in Schutzverpackungen verpackte Filter sind die sicherste Möglichkeit, solche Unfälle zu verhindern. Der Vorsterilisationsprozess für hochwertige Pipettenspitzen wird regelmäßig validiert, um die Effizienz der Vorsterilisation sicherzustellen.
Wie erleichtern Pipettier- und Dispensierwerkzeuge Wissenschaftlern den Umgang mit Proben in einer sterilen Umgebung?
Die Auswahl der richtigen Pipetten und Pipettenspitzen kann den aseptischen Arbeitsablauf erleichtern. Medizinische Yongyue-Pipetten sind leicht zu reinigen und ohne Werkzeug zu öffnen, wodurch die tägliche Reinigung beschleunigt wird. Da das Autoklavieren Kontaminationen effektiver entfernt als Ethanoltücher, sind die mechanischen Pipetten von Sartorius vollständig autoklavierbar, sodass Sie Ihre Pipetten zuverlässig dekontaminieren können. Der weiche Spitzenauswurf verhindert das potenzielle Kontaminationsrisiko durch Spritzer, wenn die Spitze ausgeworfen wird. Vorsterilisierte Filterspitzen schützen Ihre Proben vor Kreuzkontamination. Die medizinischen Spitzen von Yongyue sind außerdem in einer auslaufsicheren Verpackung verpackt, was bedeutet, dass jegliche Kontamination unter Lager- und Lieferbedingungen nicht mit den Spitzen oder der Spitzenbox in Kontakt kommt.
Wie können Wissenschaftler Umweltverschmutzung vermeiden? Was sind Ihre Top-Tipps für steriles Arbeiten?
Erstens gute Laborpraxis und sorgfältige Planung der Arbeitsschritte. Stellen Sie sicher, dass nur das, was für einen bestimmten Arbeitsablauf benötigt wird, in der Laminar-Flow-Werkbank aufbewahrt wird, und verwenden Sie gleichzeitig eine Zellkultur. Außerdem geben Ihnen regelmäßige Tests auf Verunreinigungen wie Mykoplasmen Sicherheit und Vertrauen in Ihre Ergebnisse. Beim Arbeiten unter sterilen Bedingungen lohnt sich das Geld für vorsterilisierte Filterspitzen und sterile Reagenzien.
